经典液相柱色谱具有设备简单，上样量大等优点，目前在我国仍然是中草药（包括天然药物）有效部位，有效成分的筛选分离及标准品制备的主要方法
苯在紫外光区有两个π→π*跃迁的吸收带，λ=203nm的E2吸收带和λ=256nm的B吸收带。其中B吸收带具有精细结构，它是由波长为230~267nm的7组吸收峰所组成。B吸收带是芳香族化合物的特征吸收带。
机制：以离子交换剂为固定相，用水或与水混合的溶剂作为流动相，利用它在水溶液中能与溶液中离子进行交换的性质，根据离子交换剂对各组分离子亲和力的不同使其分离的方法
机制：固定相为化学惰性，具有多空网状结构的物质，凝胶每个颗粒的结构，犹如一个筛子，小的分子可以进入胶粒内部，而大的分子则排阻在胶粒之外，而达到分离的目的。
（2）n→σ*跃迁指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向σ*反键轨道的跃迁
（3）π→π*跃迁指不饱和键中的π电子吸收光波能量后跃迁到π*反键轨道。
（4）n→π*跃迁指分子中处于非键轨道上的n电子吸收能量后向π*反键轨道的跃迁。
2、什么叫紫外吸收曲线，特点？什么叫助色团、发色团，并列举，什么叫助色效应？
保证测定有较高的灵敏度，而且曲线较为平坦，吸光系数变化不大，对Beer定律偏离较小。吸光度越大，测定的灵敏度越高，准确度就越高。
操作:将规定标准物质ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ入被测样品中，混均，进样，计算出r:s，与手册数据对比定性
目的：除去其中溶解的气体，因为气体在洗脱过程中可能形成气泡，使基线不稳，仪器不能正常工作;溶解的气体还会导致样品中某些组份被氧化，柱中固定相发生降解而改变柱的分离性能。脱气方法：超声波振动，抽真空，加热回流，吹氦，真空在线脱气
助色基团： 紫外吸收光谱中，助色团是指含有非成键N电子的杂原子饱和基团，它们本身在紫外可见光范围内不产生吸收，但当它们与生色团或饱和烃相连时，能使该生色团的吸收峰向长波方向移动，并使吸收强度增加的基团。如-OH-、-NR2、-OR、-SH、-SR、-CL、-BR、-I等。
相对保留值仅取决于它们的分配系数，而分配系数又取决于取分性质，柱温与固定液的性质，它与固定液用量，柱长，柱填充情况及其载气流速等无关
吸收光谱又称吸收曲线，以波长为横坐标，以吸收光度A为纵坐标，所绘制的物质吸光度光强随波长变化的曲线
发色基:凡是能在一段光波内产生吸收的基团,就称为这一波段的生色基/发色团/发色基团.紫外光谱的生色基一般是碳碳共轭结构,含杂原子的共轭结构,能进行n-π*跃迁的基团,能进行n-σ*跃迁并在近紫外区能吸收的原子或基团.常见的生色团有C=C-C=C,C=O,-COOH,C=C,Ph-,-NO2,-CONH2,-COCl,-COOR等
1、紫外吸收光谱是由何种跃迁产生的？有哪几种跃迁类型？分为哪几个吸收带？
紫外吸收光谱是带状光谱，分子中存在一些吸收带已被确认，其中有K带、R带、B带、E1和h E2带等
（1）σ→σ*跃迁指处于成键轨道上的σ电子吸收光子后被激发跃迁到σ*反键轨道
氢火焰离子化检测器（FID）以氢气和空气燃烧生成的火焰为能源，当有机化合物进入以氢气和氧气燃烧的火焰，在高温下产生化学电离，电离产生比基流高几个数量级的离子，在高压电场的定向作用下，形成离子流，微弱的离子流（10-12～10-8A）经过高阻（106～1011Ω）放大，成为与进入火焰的有机化合物量成正比的电信号，因此可以根据信号的大小对有机物进行定量分析。
它主要用于分析测定卤化物、含磷（硫）化合物以及过氧化物、硝基化合物、金属有机物、金属螯合物、甾族化合物、多环芳烃和共轭羟基化合物等电负性物质。另外也能分析1PPM氧气
火焰光度检测器（FPD）:含磷或硫的有机化合物在富氢火焰中燃烧时，硫、磷被激发而发射出特征波长的光谱。当硫化物进入火焰，形成激发态的S*2分子，此分子回到基态时发射出特征点蓝紫色光；当磷化物进入火焰，形成激发态的HPO*分子，它回到基态时发射出特征的绿色光（波长为480-560nm，最大强度对应的波长为526nm）。这两种特征光的光强度与北侧组份的含量均成正比，这正是FPD的定量基础。特征光经滤光片滤光，再由光电倍增管进行光电转换后，产生相应的光电流。经放大器放大后由记录系统记录下相应的色谱图。
苯胺的-NH2上有一对未成键电子，会和苯环发生P-π共轭，导致吸收红移，加酸后-NH2变为-NH3,共轭消失，其生色团就和苯相同了，故光谱也相近1溶剂的极性由非极性到极性，精细结构消失，吸收带平滑
A=ELC当一束平行的单色光通过均匀的吸光物质时，吸光度和吸光物质的的浓度和厚度之比，该定律适合单色光和稀溶液、
热导检测器（TCD :热导检测器的工作原理是基于不同气体具有不同的热导率。热丝具有电阻随温度变化的特性。当有一恒定直流电通过热导池时，热丝被加热。由于载气的热传导作用使热丝的一部分热量被载气带走，一部分传给池体。当热丝产生的热量与散失热量达到平衡时，热丝温度就稳定在一定数值。此时，热丝阻值也稳定在一定数值。由于参比池和测量池通入的都是纯载气，同一种载气有相同的热导率，因此两臂的电阻值相同，电桥平衡，无信号输出，记录系统记录的是一条直线。当有试样进入检测器时，纯载气流经参比池，载气携带着组分气流经测量池，由于载气和待测量组分二元混合气体的热导率和纯载气的热导率不同，测量池中散热情况因而发生变化，使参比池和测量池孔中热丝电阻值之间产生了差异，电桥失去平衡，检测器有电压信号输出，记录仪画出相应组分的色谱峰。载气中待测组分的浓度越大，测量池中气体热导率改变就越显著，温度和电阻值改变也越显著，电压信号就越强。此时输出的电压信号与样品的浓度成正比，这这正是热导检测器的定量基础。
6、考查仪器分析方法优劣的参数有哪些，有何含义？摩尔吸光系数百分吸光系数
步骤：（1）固定相的涂布与装柱：固定液与载体混合，装柱，（2）加样和洗脱
根据保留值与已知物对照定性或者利用检测器响应应该差别进行定性；用其他仪器或者化学方法定性；与各种结构分析仪器连用定性△f
通常选择吸光物质的最大的吸收波长为测定波长，尽量避免再A随波长变化率大处进行吸光度的测量
机制：各组份与流动相分子争夺吸附剂表面活性中心，利用吸附剂对不同组分的吸附能力的差异而实现分离
机制：将某种溶剂涂布在吸附颗粒表面或纸色谱上，形成一层夜膜，称为固定相，液质就在固定相和流动相之间发生分配，各组分因分配系数（K）不同而获得分离。
紫外检测器适用于对紫外光有吸收的样品选择组分的最大吸收波长，提高检测灵敏度
ecd是放射性离子化检测器的一种它是利用放射性同位素在衰变过程中放射的具有一定能量的粒子作为电离源当只有纯载气分子通过离子源时在粒子的轰击下电离成正离子和自由电子在所施电场的作用下离子和电子都将做定向移动因为电子移动的速度比正离子快得多所以正离子和电子的复合机率很小只要条件一定就形成了一定的离子流基流当载气带有微量的电负性组分进入离子室时亲电子的组分大量捕获电子形成负离子或带电负分子
TCD无论对单质、无机物或有机物均有响应，且其相对相应值与使用的TCD的类型、结构以及操作条件等无关，因而通用性好。
电子捕获检测器（ECD）:ECD是放射性离子化检测器的一种，它是利用放射性同位素，在衰变过程中放射的具有一定能量的β-粒子作为电离源，当只有纯载气分子通过离子源时，在β-粒子的轰击下，电离成正离子和自由电子，在所施电场的作用下离子和电子都将做定向移动，因为电子移动的速度比正离子快得多，所以正离子和电子的复合机率很小，只要条件一定就形成了一定的离子流（基流），当载气带有微量的电负性组分进入离子室时，亲电子的组分，半岛体育 半岛官网大量捕获电子形成负离子或带电负分子。因为负离子（分子）的移动速度和正离子差不多，正负离子的复合机率比正离子和电子的复合几率高105 ~ 108倍，因而基流明显下降，这样就仪器就输出了一个负极性的电信号，因此和FID相反，通过ECD被测组分输出，在数据处理上出负峰。
六通进样阀的工作原理是什么？为保证进样精度，满阀进样时加载的样品体积应为多少？
工作原理：转动手柄使贮样管内样品被流动相带人色谱柱满阀进样时注入样品体积应不小于定量环体积5—10倍
4、气相色谱的固定液是极性或非极性时，样品中不同组分各基于什么性质差异实现分离？出峰的顺序如何？相似相容
5、气相色谱的检测器有哪些？检测机理是什么？各用于什么性质的化合物检测？
从分离机制将，色谱法分为吸附色谱法（吸附能力不同）、分配色谱法（溶解度不同）、离子交换色谱法（离子交换剂上的亲和力不同）、尺寸排阻色谱法（不同分子在多孔固定相中的选择渗透而分离）
柱色谱的装柱方法：（1）干法装柱：直接往柱子里填硅胶，轻轻敲打柱子两侧，至硅胶界面不再下降为止，然后再填入硅胶至合适高度，最后再用油泵直接抽，使柱子装实，再用淋洗剂“走柱子”。（2）湿法装柱：先把硅胶用适当的溶剂拌匀后，再填入柱子中，再加压用淋洗剂“走柱子”。上样方法：（1）被分离物配成浓溶液，用吸管轻沿管壁加到含固定液载体的上端，然后加流动相洗脱；（2）被分离物溶液用少量含固定液的载体吸附，待溶剂挥发后，加在色谱柱载体的上端，然后加流动相洗脱；（3）用一块比色谱柱内径略小的圆形滤纸吸附被分离物质溶液，到溶剂挥发后，再加在色谱柱载体上，然后加流动相洗脱
2、本次实验的固定相是什么？在分离中，组分的Rf值与其极性之间的关系如何？
